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单位:厦门科朋仪器有限公司
联系人:黄先生
电话:0592-6287881
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邮箱:249191490@163.com
 首页 > 产品展示 > 厦门猪瘟检测设备试剂盒
 
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产品型号:
产品名称:

厦门猪瘟检测设备试剂盒

产品报价:
38000
产品特点:
本产品基于独特的恒温可视化检测技术,可针对血液、拭子样本、脾脏等组织样品中非洲猪瘟病毒的特异核酸片段进行
扩增,通过颜色变化判读结果。
  厦门猪瘟检测设备试剂盒的详细资料:
非洲猪瘟病毒核酸检测试剂盒(恒温可视法)
使用说明书
【产品说明】
本产品基于独特的恒温可视化检测技术,可针对血液、拭子样本、脾脏等组织样品中非洲猪瘟病毒的特异核酸片段进行
扩增,通过颜色变化判读结果。
【货 号】 YRMBV7301
【包装规格】 50 Tests/kit
【试剂盒组成】
【储存条件及有效期】
非洲猪瘟反应液 A 4℃保存 1 周,超过 1 周建议-20℃保存,并避免反复冻融 8 次以上。
样品前处理液、非洲猪瘟反应液 B、非洲猪瘟阴性对照、非洲猪瘟阳性对照和密封液可 4℃保存一个月,长期保存需要-20℃。
避光-20℃贮存,有效期均为 12 个月。(请于有效期内使用)
【适用仪器
恒温孵育器(适配 PCR 管)。
【样品采集】
1. 抗凝血样品:用真空采血管(EDTA 抗凝的真空采血管)采集 5mL 血液,备用。
2. 血清样品:采集 5mL 血液样品,室温静置凝固后收集血清,备用。
3. 组织样品:首选脾脏,其次为扁桃体、淋巴结、肾脏、骨髓、肌肉等,剪取 10g 左右样品,装入无菌袋,备用。
4. 鼻拭子样品:采用商品化拭子采样管,棉拭子采集样品后,放入拭子保存管中,备用。
注:样本如不能马上检测,可短期冷藏(2-8℃)保存,如需运输要冷藏运输。长期保存需冷冻保存。
【检测步骤】
一、DNA 提取(样本制备区)
1、全血或血清样品。直接取 20μL 样本于 1.5mL 离心管中,加入 100μL 样品前处理液,混匀,100℃加热 5 分钟后,取出立
10000rpm 离心 1 分钟,上清即为样本模板。
注意:对于全血样品,加热之后需立即离心,否则影响离心分离效果,*终影响结果的准确性。
2、新鲜组织样品(如脾脏等)。20mg 剪碎的组织样品于 1.5mL 离心管中,加入 100μL 生理盐水匀浆。取 20μL 匀浆后的
样本,加入 100μL 样品前处理液,混匀,100℃加热 5 分钟后,10000rpm 离心 1 分钟,上清即为样本模板。
3、拭子样品(如鼻拭子)。20μL 拭子保存液(或者拭子洗涤液)于 1.5mL 离心管中,加入 100μL 样品前处理液,混匀,
100℃加热 5 分钟后,5000rpm 离心 4 分钟或者 10000rpm 离心 1 分钟,上清即为样本模板。
试剂 规格及数量 存储条件
样品前处理液 1800 μL/×3 4°C
非洲猪瘟反应液 A 50μL/-20°C
非洲猪瘟反应液 B 1100 μL/-20°C
非洲猪瘟阳性对照 100 μL/-20°C
非洲猪瘟阴性对照 100 μL/-20°C
密封液 1000 μL/-20°C2 页 共 2
注意:样品前处理液使用时必须吹打均匀,否则影响提取效果。
二、试剂配制
N 个待检样品,则参照下表,按照 N+3 个数量计算各组分用量(N 个待检样品+1 个阴性对照+1 个阳性对照,多配一个
反应确保反应液分装体积的准确),将反应液置于 1.5ml 离心管中,涡旋混匀或者盖上盖子上下颠倒混匀 10-20 次,离心 30
秒,每个 PCR 管分装 23μL,并向每管加入 1 滴密封液(约 20μl)。
试剂 使用量
非洲猪瘟反应液 A 1×(N+2)μL
非洲猪瘟反应液 B 22×(N+2)μL
反应液总体积 23×(N+2)μL
三、添加模板
PCR 管中分别加入 2μl 模板,顺序为阴性对照(阴性对照管可不加入模板)、待测样品模板、阳性对照。盖紧管盖,
离心 30 秒,立即进行扩增反应。
四、扩增反应(扩增及产物分析区)
恒温仪器 65℃条件下反应 40 min
【结果判定】
在一个光线良好的环境(手机拍照开手电筒,效果更好)中观察反应液颜色(建议以白纸为背景)。如果溶液颜色仍为紫
色,则判定为非洲猪瘟病毒核酸阴性;如果溶液颜色变成天蓝色,则判定为非洲猪瘟病毒核酸阳性,结果如下。
阴性对照反应管结果为阴性,阳性对照反应管结果为阳性,此次检测结果有效,否则无效。如重复检测结果仍为
无效,请与技术支持人员联系。
【注意事项】
1、本试剂检测灵敏度高。为了防止污染,实验要分区操作。
1区:试剂准备区;2)第二区:样本制备区;第三区:模板添加区;第四区:扩增及产物分析区。
分区之间*进行物理性隔离,避免人为因素造成的污染。
2、实验过程中穿戴工作服和乳胶手套,不同区域独立使用工具,需更换手套和实验服。
3、严格按照操作步骤操作,试剂配制和加样步骤建议在冰盒上操作。如无冰盒,配好反应后,立即加入样品进行检测。
4、反应液中的成分对光敏感,应避光保存。试剂使用前要完全解冻,但应避免反复冻融,推荐使用前离心 30 秒,并按检测
频次将反应液以适当体积分管保存。
5反应结束后,扩增管请置于密封袋内丢弃,当日清理,开盖易造成气溶胶污染,禁止开盖。
6、不同批号试剂请勿混合使用,在有效期内使用。
7、试剂盒仅用于科研用途。 

原创作者:厦门科朋仪器有限公司

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