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单位:厦门科朋仪器有限公司
联系人:黄先生
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 首页 > 产品展示 > 福建总代非洲猪瘟病毒核酸检测试剂盒
 
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产品型号:
产品名称:

福建总代非洲猪瘟病毒核酸检测试剂盒

产品报价:
38000
产品特点:
本产品用于非洲猪瘟病毒的检测,检出限为102 copies/μl。
  福建总代非洲猪瘟病毒核酸检测试剂盒的详细资料:

非洲猪瘟病毒核酸检测试剂盒(恒温荧光法)使用说明书

产品说明

本产品基于独特的恒温荧光检测技术,可针对抗凝血、脾脏、扁桃体、淋巴结、肾脏和骨髓等样品中非洲猪瘟病毒的的特异核酸片段进行扩增,仪器实时监测扩增过程中的荧光信号变化,自动判读结果。

本产品用于非洲猪瘟病毒的检测,检出限为102 copies/μl

【货    号】 YRMBV7201-2

【包装规格】 50T

【试剂盒组成

试剂

规格及数量

存储条件

A-ASFV-I

1100 μL/

-20°C

B-I

50 μL/

-20°C

C-I

1000 μL/

-20°C

PG-ASFV-I

100 μL/

-20°C

NG

100 μL/

-20°C

 

【储存条件及有效期】

-20℃保存,有效期为12个月(请在有效期内使用)。

适用仪器

YR-820 恒温扩增荧光检测仪

【样品采集及存放】

待测样品为 -20℃保存样本或新鲜待检样本

样品处理

可采集发病动物或同群动物的血清学样品和病原学样品,病原学样品主要包括抗凝血、脾脏、扁桃体、淋巴结、肾脏和骨髓等。如环境中存在钝缘软蜱,也应一并采集。

样品的包装和运输应符合农业部《高致病性动物病原微生物菌(毒)种或者样本运输包装规范》规定。规范填写采样登记表,采集的样品应在冷藏和密封状态下运输到相关实验室。

一、血清学样品:无菌采集5ml血液样品,室温放置12~24h,收集血清,冷藏运输。到达检测实验室后,冷冻保存。

二、病原学样品

1.抗凝血样品:无菌采集5ml抗凝血,冷藏运输。到达检测实验室后,-70℃冷冻保存。

2.组织样品

2.1 首选脾脏,其次为扁桃体、淋巴结、肾脏、骨髓等,冷藏运输。

2.2 样品到达检测实验室后,-70℃保存。

3.钝缘软蜱

3.1 将收集的钝缘软蜱放入有螺旋盖的样品瓶/管中,放入少量土壤,盖内衬以纱布,常温保存运输。

3.2 到达检测实验室后,-70℃冷冻保存或置于液氮中;如仅对样品进行形态学观察时,可以放入100%酒精中保存。

【检测步骤】

自备材料和仪器:灭菌1.5mL2.0mL离心管;灭菌0.2mL PCR管或八联管;冰盒;移液器(0.5-10μL10-100μL100-1000μL)及配套灭菌吸头;离心机涡旋混匀器;属浴

DNA提取(样本制备区)

建议使用病毒基因组DNA提取试剂盒系列产品,具体过程详见说明书。

、试剂配制(试剂准备区,放置于冰盒中进行)

若有N个待检样品,则参照下表,按照N+2个数量计算各组分用量(N个待检样品+1个阴性对照NG+1阳性对照PG),将反应液置于0.6ml或者1.5ml离心管中,涡旋混匀,离心30秒,分装于0.2ml PCR管中,并向每管加入1C-I(约20μl)。

试剂

使用量

A-ASFV-I

22×(N+2)μL

B-I

 1×(N+2)μL

反应液总体积

23×(N+2)μL

、添加模板(模板添加区,放置于冰盒中进行)

PCR管中分别加入2μl模板,顺序为阴性对照(阴性对照管可不加入模板)、待测样品模板、PG-ASFV-I,离心30秒,立即进行扩增反应。

、扩增反应(扩增及产物分析区)

()、恒温仪器63℃条件下反应30 min。待仪器升温至63℃后,新建程序,设置实验名称及反应时间,将步骤三中离心后的PCR反应管放入恒温扩增荧光检测仪,点击开始检测。

()、若使用荧光定量PCR仪,则荧光基团选择FAM,淬灭基团选择None,将63℃ 15 s63℃ 45 s作为一个循环,于63℃ 45 s处收集荧光信号,30个循环。

其他仪器请参照仪器说明书进行设置。

结果判定

1、 仪器自动判定结果,若显示阳性,则样品中含有非洲猪瘟病毒

若显示阴性,则样品中不含有非洲猪瘟病毒或含量低于检测限。

2、 检测仪上,根据有无“S”型扩增曲线判定结果。

若有“S”型扩增曲线,则样品中含有非洲猪瘟病毒

若无“S”型扩增曲线,则样品中不含有非洲猪瘟病毒或含量低于检测限。

« 阴性对照反应管结果显示阴性阳性对照反应管结果显示阳性,此次检测结果有效,否则无效。如重复检测结果仍为无效,请与技术支持人员联系。

注意事项

1本试剂检测灵敏度高。为了防止污染,实验要分区操作。

1区:试剂准备区2)第二区:样本制备区第三区:模板添加区第四区:扩增及产物分析区。

 分区之间*进行物理性隔离,避免人为因素造成的污染。

2实验过程中穿戴工作服和乳胶手套,不同区域独立使用工具,需更换手套和实验服。

3严格按照操作步骤操作,试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。

4反应液中的成分对光敏感,应避光保存。试剂使用前要完全解冻,但应避免反复冻融,推荐使用前离心30秒,并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。

5反应结束后,扩增管请置于密封袋内丢弃,当日清理,开盖易造成气溶胶污染,禁止开盖。

6不同批号试剂请勿混合使用,在有效期内使用。

原创作者:厦门科朋仪器有限公司

产品相关关键字:厦门猪瘟检测   泉州猪瘟检测   漳州猪瘟检测   
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